Одноетапний набір для швидкого виявлення мікоплазми (метод ізотермічної ампліфікації)

Набір може швидко виявити вісім видів мікоплазми в культуральному середовищі клітин за допомогою техніки ізотермічної ампліфікації та візуальної зміни кольору. Без екстракції ДНК 1 мкл супернатанту культури клітин безпосередньо додавали до реакційного розчину та 30 хвилин реагували при 65 градусах. Колір позитивного зразка змінився з жовтого на червоний, і для всього процесу не потрібен інструмент ПЛР або відкрита кришка для електрофорезу, що дозволяє ефективно уникнути перехресного забруднення, спричиненого аерозолем. Порівняно з традиційним методом ПЛР цей продукт має такі переваги, як проста робота, висока чутливість і здатність переносити різноманітні інгібітори ПЛР у культуральному середовищі, тому немає хибнонегативного явища, а результати виявлення дуже відповідають результатам КПЦР.

Транспортується з мокрим льодом і зберігається при -20 градусів; дійсний до 12 місяців.

a: Містить хромогенні агенти.

Перед початком роботи (уважно прочитайте)

Заздалегідь встановіть водяну баню на 65 градусів або металевий нагрівальний блок.

1. Підготовка зразка для перевірки:

a. Прикріплені клітини: поглинають супернатант безпосередньо. Рекомендується відбирати зразки, якщо інокуляція клітин або зміна рідини триває більше 3 днів, а ступінь злиття становить близько 90%. У цей час вміст мікоплазми в надосадовій рідині високий і легко виявляється.

b. Суспензія клітин: супернатант отримували після центрифугування при 1,000 об/хв протягом 5 хв. Рекомендується відбирати зразки після інокуляції клітин або заміни рідини протягом більше 3 днів, коли вміст мікоплазми в культуральному середовищі клітин високий і може бути легко виявлений.

2. Система реакцій

a: Mycored Buffer використовується у перевернутому вигляді після розморожування.

b: Відповідно до кількості зразків, після того, як описана вище реакційна система буде підготовлена, упакуйте її в реакційну пробірку, додайте 20 мкл парафінової олії, а потім перейдіть до наступного кроку.

3. Додайте зразки

a. Негативний контроль: у першу реакційну пробірку не було додано жодного зразка як негативний контроль.

b. Позитивний контроль: 1 мкл позитивного контролю було додано в останню реакційну пробірку як позитивний контроль.

в. Зразок для тестування: Додайте 1 мкл супернатанту культури клітин до решти реакційної пробірки.

Відповідь: простягніть головку наконечників піпетки під рівень парафінової олії, щоб додати зразки.

4. Умова реакції

Перемістіть реакційну пробірку в попередньо нагріту до 65 градусів водяну баню або металеву баню для інкубації 30 хвилин. Якщо розвиток кольору не помітний, час реакції можна збільшити до 40 хв.

Вийміть реакційну пробірку відразу після закінчення реакції, і якщо реакційний розчин все ще жовтий після того, як його температура відновиться до кімнатної, результат буде негативним. Якщо реакційний розчин забарвиться в червоний колір, результат позитивний. Реакційну трубку не можна відкривати, інакше це легко призведе до аерозольного забруднення.

1. Не відкривайте реакційну пробірку після закінчення реакції.

2. Рекомендується використовувати наконечники піпеток з фільтруючим елементом у процесі приготування реакційного розчину, а викинуті наконечники піпеток і реакційну трубку слід помістити в самозакривається пакет і вчасно поводитися з ними.

3. Використовуйте очищувач нуклеїнової кислоти (рекомендовано G3020), щоб часто протирати тестовий стенд і піпетку.

Тільки для дослідницького використання!

Популярні Мітки: одноетапний набір для швидкого виявлення мікоплазми (метод ізотермічної ампліфікації), Китай, набір для одноетапного швидкого виявлення мікоплазми (метод ізотермічної ампліфікації) виробники, постачальники, фабрика